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      Celetrix電轉儀操作步驟介紹

      發布時間:2021-04-21

      閱讀:1531

             Celetrix電轉儀適用所有真核細胞;可以電轉DNA、RNA、siRNA、蛋白質等。擁有示波器功能,顯示實際通過樣品的電流波形,可視化掌控實驗質量。電脈沖參數設定方便,內部電路反應迅速,設定完成即可啟動,瞬間完成電轉。
      操作步驟:
      1、懸浮細胞(貼壁細胞先消化成單細胞狀態)1000rpm離心3min。
      2、無血清細胞培養液洗一遍、1000rpm離心1min。
      3、重懸細胞在電轉液中,加入DNA,將細胞轉移至電擊管蓋好并放入儀器中。
      4、設定參數進行電擊,大部分細胞系可以使用30ms單脈沖,只需改變一個電壓參數。
      5、取出細胞進行培養。
      細胞電轉效率影響因素:
      1.實驗操作細節很關鍵,具體操作中注意混勻的時候切勿產生氣泡;加質粒的時候槍頭液體務必打干凈,勿殘留液體;吹打不能太用力,避免細胞損傷;細胞量必須達到電轉的細胞數量要求;細胞吹散;上清吸干凈,體積準確。
      2.細胞本身的性質,分子的性質,直徑的大小和均勻度是影響實驗結果的關鍵因素,選擇合適的電轉時機很重要。
      3.電轉樣品容器的選擇也很關鍵,選擇一個密閉的承壓容器,可以有效的減免氣泡對電轉的負面影響。
      4.使用專門的電轉液能更加有效的提高電轉效率。
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